AAT Bioquest16052 MitoROS™ 580 *Optimized for Detecting Reactive Oxygen Species (ROS) in Mitochondria* 500 Tests 

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美國(guó)AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助quan世界的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest 16052 MitoROS™ 580 *Optimized for Detecting Reactive Oxygen Species (ROS) in Mitochondria* 500 Tests，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號(hào)：16052

產(chǎn)品名稱：MitoROS™580*優(yōu)化用于檢測(cè)線粒體中的活性氧（ROS）*

英文名稱：MitoROS™ 580 *Optimized for Detecting Reactive Oxygen Species (ROS) in Mitochondria*

產(chǎn)品規(guī)格：500 Tests

 AAT Bioquest優(yōu)化用于檢測(cè)線粒體中的活性氧

產(chǎn)品說明：

活性氧（ROS）是含有氧的化學(xué)反應(yīng)分子。實(shí)例包括超氧化物、羥基自由基、單線態(tài)氧和過氧化物。由于存在不成對(duì)的價(jià)殼電子，ROS具有高度反應(yīng)性。ROS是氧氣正常代謝的天然副產(chǎn)物，在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和體內(nèi)平衡中具有重要作用。然而，在環(huán)境壓力（例如紫外線或熱暴露）期間，ROS水平會(huì)急劇增加。這可能會(huì)對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成嚴(yán)重?fù)p害。累積起來，這被稱為氧化應(yīng)激。MitoROS™ 580是一種超氧化物敏感染料，在加載到活細(xì)胞中時(shí)定位于線粒體中。MitoROS™ 580被超氧化物氧化產(chǎn)生紅色熒光。MitoROS™ 580 可用于使用熒光顯微鏡或熒光流式細(xì)胞儀監(jiān)測(cè)線粒體中的超氧化物。MitoROS™ 580試劑滲透到活細(xì)胞中，選擇性地靶向線粒體。它被超氧化物迅速氧化。它不太可能被其他活性氧（ROS）和活性氮（RNS）氧化。氧化產(chǎn)物在細(xì)胞中具有高熒光。MitoROS™ 580為研究各種病理中的氧化應(yīng)激提供了有價(jià)值的工具。

示例協(xié)議

一目了然

重要說明

此協(xié)議僅提供指南，應(yīng)根據(jù)您的特定需求進(jìn)行修改。在制作MitoROS™ 580工作溶液之前根據(jù)需要處理細(xì)胞。

儲(chǔ)備液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

1. MitoROS 580 儲(chǔ)備溶液 （1000X）將 13 μL DMSO 加入 MitoROS™™ 580 小瓶中并充分混合。

注意：未使用的儲(chǔ)備溶液可以儲(chǔ)存在-20oC.避光。

工作溶液的制備

MitoROS™ 580工作溶液（2X）：

將DMSO儲(chǔ)備溶液稀釋到具有20 mM Hepes緩沖液（HHBS）的Hanks溶液中，制成2X工作溶液。注意：2X MitoROS™ 580工作溶液不穩(wěn)定，請(qǐng)及時(shí)使用。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

1. 根據(jù)需要處理細(xì)胞。

2. 將細(xì)胞（例如100μL/孔在96孔板中）與等體積的2X MitoROS™ 580工作溶液在10°C下孵育30-37分鐘，避光。注意：MitoROS™ 580的最終細(xì)胞濃度不應(yīng)超過1 X.濃度超過1 X會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性作用，包括線粒體形態(tài)改變以及熒光重新分布到細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)。注意：不同的細(xì)胞對(duì)MitoROS™ 580的反應(yīng)不同，相應(yīng)地調(diào)整工作濃度。

3. 輕輕洗滌細(xì)胞三次，然后用HHBS緩沖液代替。

4. 使用適當(dāng)?shù)臒晒鈨x器（例如熒光顯微鏡，流式細(xì)胞儀）分析細(xì)胞，Ex / Em = 510 / 580 nm。

  AAT Bioquest優(yōu)化用于檢測(cè)線粒體中的活性氧

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